De pH van de Giemsa buffer:

Om een Giemsa werkoplossing te maken wordt de Giemsa stockoplossing vlak voor gebruik aangelengd met een fosfaat buffer (Giemsabuffer). Giemsa kleurstoffen zijn zeer gevoelig voor kleine pH veranderingen. Om een optimaal kleurcontrast tussen chromatine en cytoplasma te te bewerkstelligen en de Schüffnerse stippeling, de James’dots en Maurer’ dots duidelijk zichtbaar te maken moet de pH een waarde hebben van 7.1 – 7.2.

Bij een lagere pH (< 7.1 -7.2) worden Schüffnerse stippeling, James’dots en Maurer’s dots minder goed zichtbaar. Bij hogere waarden (pH > 7.2) worden ze te donker.

Wanneer de buffer niet stabiel is zal het resultaat van de kleuring wisselend zijn. 

De Giemsakleurstof is zeer gevoelig voor sterke zuren en basen in de oplossing. De buffer wordt daarom bereid met zouten van zwakke zuren en basen, meestal zouten van natrium- en kaliumfosfaat.

De buffer kan zelf worden bereid waarbij de chemicalien zorgvuldig worden afgewogen en de pH nauwkeurig wordt gecontroleerd. Een alternatief is het gebruik van buffertabletten.

Bewaar de buffer in de koelkast (2-8°C) in een goed afsluitbare, liefst plastic fles. De bufferoplossing, bereid uit de stamoplossing of uit tabletten, is maximaal 4 weken in de koelkast houdbaar. De stamoplossing daarentegen blijft maanden stabiel. Vermijdt tijdens gebruik direct zonlicht, dit bevordert de groei van algen. Controleer regelmatig op contaminatie (troebel aspect) en breng Giemsabuffer vóór gebruik op kamertemperatuur.